外泌體研究在腫瘤領(lǐng)域已經(jīng)卷瘋了，似乎每個課題都在「拼手速」、「拼表征」。但外泌體研究的潛力遠不止于此，這些有趣又冷門的研究或許能打開你的思路：

ACS Nano：姜黃重組納米囊泡高效肥胖干預(yù)

集美大學(xué)的研究團隊通過重組姜黃來源的納米囊泡（Rec-tNVs），發(fā)現(xiàn) Rec-tNVs 通過促進脂肪分解、抑制脂肪生成、誘導(dǎo)脂肪細胞棕色化及多通路觸發(fā)凋亡，在細胞與動物模型中均表現(xiàn)出劑量依賴性降脂及抗肥胖效果。植物外泌體在此作為天然納米遞送載體，不僅高效包封姜黃素及其他活性成分，還通過其仿生特性增強靶向性為肥胖治療提供了天然、多效的解決方案[1]。

Theranostics：大蒜特定成分可改善高脂飲食引起的肥胖

研究人員在口服給予高脂飲食小鼠大蒜外泌體樣納米顆粒（GaELNs），發(fā)現(xiàn) GaELNs 可被小膠質(zhì)細胞優(yōu)先攝取，減輕神經(jīng)炎癥，改善肥胖小鼠的血糖響應(yīng)、胰島素敏感性和記憶功能。植物外泌體在此不僅實現(xiàn)活性脂質(zhì)的定向遞送，更通過其內(nèi)容分子直接調(diào)控神經(jīng)免疫和代謝途徑，系統(tǒng)性干預(yù)肥胖及相關(guān)神經(jīng)炎癥[2]。

J Adv Res：生姜外泌體調(diào)節(jié)腸道菌群緩解腸道炎癥

研究人員通過外泌體試劑盒結(jié)合差速離心法分離出生姜外泌體樣納米顆粒（GELNs），發(fā)現(xiàn) GELNs 里的植物 miRNA ，能跨界調(diào)控宿主免疫，抑制炎癥通路，減輕腸道炎癥。研究不僅揭示植物-動物跨界調(diào)控機制，更為口服型抗炎制劑開發(fā)提供新思路[3]。

相比于動物外泌體，植物外泌體（PDNVs）看似冷門，但其來源廣泛、成本低、免疫原性低、生物相容性好[4]。特別是像靈芝、鹿茸、人參等中藥來源的外泌體這些年的研究進展更是頻出，它們富含活性成分，在抗炎、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等方面展現(xiàn)出明確潛力。

PDNVs 作用機制尚未完全明確，仍有很大的研究空間，但同時因為 PDNVs 研究樣本間差異較大（有非常容易榨汁的葡萄，也有很黏的蘆薈，也有半干的黃芪，也有特別不容易溶解的鎖陽等），也存在提取與純化標(biāo)準(zhǔn)化不足，不同方法（如超離心、超濾）導(dǎo)致其成分異質(zhì)性高，保存穩(wěn)定性差等問題。

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下面以植物囊泡提取純化試劑盒（多汁植物）為例為您介紹提取方法和注意事項：

相關(guān)操作步驟：

一

榨汁前準(zhǔn)備

1、榨汁機消毒：將榨汁機各部件拆分開，噴灑 75% 酒精仔細擦拭后，放入生物安全柜紫外消毒至少 20 min；

2、樣品準(zhǔn)備：按照試劑盒處理量準(zhǔn)備待提取樣品；

注：試劑盒處理量

3、樣品處理：將新鮮的待提取植物洗凈外表皮后，用無塵布擦干，放入生物安全柜紫外消毒至少 20 min后，將植物切成方便榨汁的小塊；

注：

a. 皮厚的植物（如葛根）需要先洗凈外皮、消毒后去皮切小塊或削成薄片；
b. 皮薄的植物（如三七、地黃、姜黃）可以洗凈外皮，消毒后直接切小塊，準(zhǔn)備榨汁。

二

榨汁

1、榨汁機準(zhǔn)備：在生物安全柜下，將完成消毒的榨汁機部件按照榨汁機說明書組裝；

2、榨汁：將切好的植物小塊投入榨汁機榨汁，質(zhì)地偏硬的植物注意少量多次，收集植物汁液，榨汁完成。

注：如需控制內(nèi)毒素，榨汁過程請在生物安全柜內(nèi)進行。

三

離心去雜

1、低速離心去雜：將榨汁后的汁液于 4 ℃，5,000 ×g，10 min 離心，收集上清；

2、高速離心去雜：將低速離心后收集的上清于 4 ℃，10,000 ×g，10 min 離心，收集上清。

四

提取囊泡

1、上清液預(yù)處理：在去除雜質(zhì)后的植物汁液中加入混勻的 Solution A 試劑，添加劑量如下（其他劑量可按添加比例換算）：

注：Solution A 試劑使用前需混勻。

2、混合孵育：加入 Solution A 試劑后蓋好管蓋，顛倒混勻 8～10 次，將混合液 37 ℃ 水浴 16 h 左右（過夜）；

3、調(diào) pH：將孵育好的混合液取出，在生物安全柜下用試劑盒自帶的 1M NaOH 和 1% 檸檬酸將混合液 pH 調(diào)至 7.0；

4、高速離心去雜：將調(diào) pH 后的上清 4 ℃，10,000 ×g，20 min 離心后收集上清；

5、過濾：將收集到的上清依次經(jīng) 1 μm 濾膜和 0.45 μm 濾膜過濾；

注：如需獲得 30～1,000 nm 植物囊泡，可只進行 1 μm 濾膜過濾，不進行 0.45 μm 濾膜過濾。

6、加提取試劑：取上步離心上清液加入 Solution B 試劑，添加劑量如下（其他劑量請等比例換算）：

7、二次混合孵育：加入 Solution B 后擰緊管蓋，通過渦旋振蕩器混勻 1 min，將混合液 4 ℃ 靜置 4 h 左右；

8、沉淀植物囊泡：取孵育好的混合液，于 4 ℃，10,000 ×g，60 min 離心，棄上清，將含有沉淀的離心管再次于 4 ℃，10,000 ×g，2 min 離心后，吸盡上清；

注：沉淀中富含植物囊泡，需盡可能吸盡上清液。

9、植物囊泡重懸：取合適量的 1 × PBS 均勻吹打離心沉淀，待其溶解后，將重懸液轉(zhuǎn)移至新的 1.5 mL EP 管中（建議每 20 mL 植物汁液用 400 μL 左右 1 × PBS 重懸）；

10、植物囊泡收獲：將含有重懸液的 1.5 mL EP 管于 4 ℃，12,000 ×g 離心 2 min，保留上清液，其中富含植物囊泡顆粒；

注：若沉淀較多，可 12,000 ×g，2 min 離心多次至無明顯沉淀，每次取上清。

五

純化和保存植物囊泡

1、純化植物囊泡：將收獲的植物囊泡顆粒粗品轉(zhuǎn)入 Exosome Purification Filter（EPF 柱）上室中，于 4 ℃，3,000 ×g 離心 10 min，離心后收集 EPF 柱管底的液體，此液體即為純化后的植物囊泡顆粒；

注：a. EPF 柱不可重復(fù)使用；b. 如需獲得大顆粒植物囊泡，可不進行該步驟。

2、植物囊泡保存：將純化后的植物囊泡以合適體積進行分裝凍存于 -80 ℃ 低溫冰箱中，以備后續(xù)實驗使用。

注意事項

1、2 T 試劑盒內(nèi)的 Solution A 溶液，收到后盡快放-80 ℃保存，使用前 4 ℃ 解凍，解凍后盡快用完，禁止反復(fù)凍融。

2、20 T 試劑盒內(nèi)的 Solution A 溶液，收到后可以按照單次使用量分裝，保存在 -80 ℃，使用前取出解凍。

3、Solution A 試劑靜置有棕黃色沉淀，屬于正常現(xiàn)象，使用前需混勻。

4、若對內(nèi)毒素有嚴格要求，榨汁步驟請嚴格在生物安全柜下進行，關(guān)鍵用品和儀器注意消毒后使用。

5、純化后的植物囊泡可保存在 -80 ℃ 冰箱中，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致植物囊泡破裂。

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內(nèi)容策劃：王丹琦

內(nèi)容審核：吳軍

題圖來源：圖蟲創(chuàng)意

參考文獻

[1] Wang J , Zhang T , Gu R ,et al.Development and Evaluation of Reconstructed Nanovesicles from Turmeric for Multifaceted Obesity Intervention[J].ACS Nano, 2024, 18(34):19.DOI:10.1021/acsnano.4c05309.

[2] Sundaram K, Mu J Y, Kumar A, et al. Garlic exosome-like nanoparticles reverse high-fat diet induced obesity via the gut/brain axis [J]. Theranostics, 2022, 12(3): 1220-1246.

[3] Yan L , Cao Y , Hou L ,et al.Ginger exosome-like nanoparticle-derived miRNA therapeutics: A strategic inhibitor of intestinal inflammation[J].Journal of Advanced Research, 2025, 69(000):1-15.DOI:10.1016/j.jare.2024.04.001.

[4] Zheng Y , Wang T , Zhang J ,et al.Plant-Derived Nanovesicles: A Promising Frontier in Tissue Repair and Antiaging[J].[2025-08-21].