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近期飼料“帶毒”爭(zhēng)議再度引發(fā)行業(yè)關(guān)注。在珠三角地區(qū)，有鱖魚養(yǎng)殖從業(yè)者送檢的多批次飼料樣品中被檢出病毒CT值呈陽性，部分養(yǎng)殖戶因此質(zhì)疑飼料或是鱖魚養(yǎng)殖高失敗率的主因。此類爭(zhēng)論并非首次出現(xiàn)：2022年，某大型飼料企業(yè)的蝦料曾被檢出白斑病毒陽性，同期江蘇如東亦有人通過PCR技術(shù)在蝦料中檢測(cè)到蝦腸肝胞蟲DNA片段，并由此與企業(yè)產(chǎn)生糾紛。記者認(rèn)為，業(yè)內(nèi)應(yīng)保持理性，切勿跟風(fēng)。

即便飼料病毒檢測(cè)陽性，它也不具備感染能力

膨化鱖魚料的生產(chǎn)經(jīng)歷高溫高壓的過程，即便存在致病菌、病毒等微生物，也均已被滅活而失去活性，不具備感染能力。

其生產(chǎn)過程主要如下：

第一是核心滅菌環(huán)節(jié)：飼料原料在調(diào)質(zhì)階段，100℃以上蒸汽注入調(diào)制3-5分鐘+膨化工序的110-120℃高溫+20-40大氣壓高壓+持續(xù)15-60秒，構(gòu)成了一個(gè)遠(yuǎn)超病毒滅活閾值的極端物理環(huán)境。病毒最基本的生命物質(zhì)（蛋白質(zhì)和核酸）在此條件下發(fā)生不可逆變性、降解。

第二是干燥二次保障：后續(xù)的干燥過程（90-100℃持續(xù)12-20分鐘）提供了額外的熱處理冗余，進(jìn)一步確保任何理論上的僥幸殘留被清除。

第三是封閉式后處理：冷卻、噴涂、包裝均在可控的潔凈環(huán)境中進(jìn)行，有效隔絕了環(huán)境中病原的再次污染。

病毒由蛋白質(zhì)與核酸組成，其核酸由蛋白質(zhì)外殼所包裹。通俗地講，把它比作一顆雞蛋，它有完整的蛋殼、蛋清、蛋黃，如果把條件控制好，它甚至能孵出小雞來。而經(jīng)過加熱后，蛋清蛋黃發(fā)生變性成為固體，煮熟的雞蛋再也不可能孵出小雞了。

然而，飼料中是否真的可能存在病毒片段呢？旺海集團(tuán)將9個(gè)不同廠家的鱖魚飼料樣品，送到6家不同的檢測(cè)機(jī)構(gòu)檢測(cè)病毒，有兩家機(jī)構(gòu)均未檢出病毒；一家機(jī)構(gòu)僅7號(hào)樣品檢測(cè)ISKNV的CT值41.8(理論上應(yīng)判為陰性，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：CT值>40應(yīng)判斷為陰性)，其余機(jī)構(gòu)則檢測(cè)到3份或以上的樣品ISKNV的CT值35以內(nèi)，個(gè)別檢測(cè)的ISKNV的CT值甚至達(dá)到16(中強(qiáng)陽性)。

這一復(fù)雜的檢測(cè)結(jié)果，該相信哪個(gè)？

病毒檢測(cè)行業(yè)缺乏規(guī)范，檢測(cè)結(jié)果不具備說服力

隨著養(yǎng)殖技術(shù)的進(jìn)步，不少養(yǎng)殖戶也逐漸提高了病害檢測(cè)的意識(shí)，我們都知道在拿苗前都要去做一下檢測(cè)確保其本身不帶毒，從而減少養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。然而相信不少養(yǎng)戶也發(fā)現(xiàn)這樣的一個(gè)問題，同樣一批苗送去不同的檢測(cè)點(diǎn)檢出結(jié)果可謂天差地別，有的檢測(cè)點(diǎn)檢出陰性，有的卻又檢出陽性，甚至強(qiáng)陽性。

新冠核酸檢測(cè)造假還記得吧。新冠疫情期間據(jù)各媒體報(bào)道，全國(guó)已經(jīng)查到250多家核酸檢測(cè)公司有問題。他們的主要問題是：故意造假，陰陽顛倒，把核酸檢測(cè)陰性改為陽性。其次，那些公司的取樣和測(cè)試人員沒有經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，不懂核酸檢測(cè)技術(shù)和規(guī)范。第三，公司沒有嚴(yán)格的規(guī)章制度，管理混亂。第四，公司的核酸檢測(cè)人員工作馬虎，粗枝大葉，樣本測(cè)試錯(cuò)誤、數(shù)據(jù)記錄錯(cuò)誤屢見不鮮。

魚病檢測(cè)更有甚者！這一亂象的背后，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)也愈演愈烈。如無資質(zhì)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)、不懂核酸檢測(cè)技術(shù)和規(guī)范的操作人員、各種花樣的檢測(cè)試劑盒和檢測(cè)儀器、不規(guī)范的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室與檢測(cè)流程等等。一些唯利是圖的相關(guān)從業(yè)者，出具“假陽”、“假陰”結(jié)果誤導(dǎo)養(yǎng)殖戶。如假陽性結(jié)果，誤導(dǎo)養(yǎng)殖戶盲目排塘或過度用藥；假陰性結(jié)果，掩蓋疫病風(fēng)險(xiǎn)，如個(gè)別檢測(cè)點(diǎn)為維護(hù)合作苗場(chǎng)利益，故意出具陰性報(bào)告，導(dǎo)致養(yǎng)殖戶購(gòu)入帶病苗種。其中有多少黑幕這里就不多說了，參考新冠核酸造假即可。

PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)是什么，你是否達(dá)標(biāo)？

標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域且壓差控制。分別包括試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品處理區(qū)、核酸擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)都有一個(gè)緩沖區(qū)。①試劑準(zhǔn)備區(qū)用于貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的準(zhǔn)備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備；②樣品處理區(qū)用于臨床標(biāo)本的保存，核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和所測(cè)定核酸的合成；③核酸擴(kuò)增區(qū)用于DNA合成、DNA擴(kuò)增及檢測(cè)；④產(chǎn)物分析區(qū)用于擴(kuò)增片段的進(jìn)一步分析測(cè)定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測(cè)序等；⑤緩沖區(qū)用于阻絕空氣交換。

每個(gè)區(qū)域都通過氣壓進(jìn)行調(diào)節(jié)，以防止在整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和樣本受到氣溶膠污染，并減少擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。

通?？筛鶕?jù)實(shí)驗(yàn)方法的不同和需要進(jìn)行區(qū)域合并。比如使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀時(shí)，擴(kuò)增區(qū)與產(chǎn)物分析區(qū)可合并；全自動(dòng)一體化儀器可合并樣本制備至產(chǎn)物分析區(qū)。

實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)不規(guī)范，氣溶膠污染問題將十分嚴(yán)重。氣溶膠污染通俗的講就是很小的固體或者液體顆粒（像灰塵、煙塵、霧滴）飄在空氣里。這些顆粒非常小，小到只有0.01微米，大的也不超過10微米。它們能在空氣中停留很長(zhǎng)時(shí)間，少則幾個(gè)小時(shí)。

在PCR實(shí)驗(yàn)室中，氣溶膠污染主要發(fā)生在樣本制備和PCR擴(kuò)增過程，實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)不足或氣流紊亂，將使含核酸顆粒長(zhǎng)期懸浮并擴(kuò)散，單個(gè)氣溶膠顆粒可攜帶高達(dá)48,000個(gè)核酸拷貝，微量污染即可引發(fā)假陽性。且氣溶膠污染是漸進(jìn)過程，未及時(shí)清潔的儀器表面（如移液器內(nèi)壁、臺(tái)面）會(huì)持續(xù)釋放污染顆粒，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室環(huán)境整體惡化。筆者當(dāng)初也從事過病毒檢測(cè)相關(guān)工作，充分體會(huì)到了氣溶膠污染的“魔力”。

飼料經(jīng)過高溫膨化，在這種情況下卻認(rèn)為飼料檢出陽性且是導(dǎo)致鱖魚養(yǎng)殖高失敗率的主因，難道不是違背常識(shí)？科學(xué)的檢測(cè)方法不應(yīng)成為飼料企業(yè)市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)的手段，且業(yè)內(nèi)應(yīng)保持理性切勿跟風(fēng)。另外，鱖魚飼料“帶毒”風(fēng)波實(shí)為行業(yè)規(guī)范缺失的縮影。破解困局需雙管齊下：短期需建立檢測(cè)機(jī)構(gòu)認(rèn)證與結(jié)果復(fù)核機(jī)制；長(zhǎng)期應(yīng)推動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室強(qiáng)制規(guī)范及全鏈條追溯體系，從源頭遏止“核酸造假”亂象。唯有強(qiáng)化監(jiān)管與科學(xué)認(rèn)知，方能避免養(yǎng)殖戶在“假陽性恐慌”與“假陰性風(fēng)險(xiǎn)”中反復(fù)迷失。

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作者：王權(quán)

水產(chǎn)人為“大國(guó)漁業(yè)”加油！