三、雙價疫苗的免疫應(yīng)答與長期保護效果3.1 強大且持久的抗體反應(yīng)

研究團隊將小鼠分為三組進行免疫：

1. 雙價疫苗組：m8Δ-Pf/Pv 初始免疫 + AAV1-Pf+AAV1-Pv 加強免疫

2. 混合疫苗組：m8Δ-Pf + m8Δ-Pv 初始免疫 + AAV1-Pf+AAV1-Pv 加強免疫

3. 單價疫苗組：分別針對兩種瘧原蟲的單價疫苗免疫（表 1）

表 1 疫苗組及免疫方案。展示了單價、雙價和混合疫苗的初始免疫和加強免疫所用載體及劑量。

結(jié)果顯示，雙價疫苗誘導(dǎo)了針對四種抗原的高滴度抗體，且在免疫后8 個月內(nèi)持續(xù)維持（圖 3）。盡管雙價疫苗的抗 CSP 抗體滴度低于單價和混合疫苗組（圖 2a-c），但其保護效果更優(yōu)，提示免疫應(yīng)答的質(zhì)量（如針對關(guān)鍵表位）可能比數(shù)量更重要。

圖 2 抗體滴度評估。（a-d）分別為針對 PfCSP、Pfs25、PvCSP-VK210、Pvs25 的抗體滴度；（e）針對 PvCSP-VK247 的抗體滴度（未檢測到）。

圖 3 長期抗體滴度評估。雙價疫苗免疫后 224 天內(nèi)，針對 PfCSP（a）、Pfs25（b）、PvCSP-VK210（c）、Pvs25（d）的抗體滴度變化。

3.2 抗體應(yīng)答的特異性分析

對惡性瘧原蟲 PfCSP 的 N 端、重復(fù)區(qū)和 C 端的抗體反應(yīng)分析發(fā)現(xiàn)：

• 單價疫苗組中，47.54% 的抗體針對重復(fù)區(qū)，47.14% 針對 C 端；

• 雙價和混合疫苗組中，C 端的抗體占比顯著提高（分別為 79.13% 和 84.13%），重復(fù)區(qū)占比下降（圖 4）。

這表明雙價疫苗使抗體應(yīng)答更集中于C 端區(qū)域，而該區(qū)域可能與保護作用密切相關(guān)。

3.3 針對轉(zhuǎn)基因瘧原蟲的保護效力

在小鼠實驗中，雙價疫苗對表達 PfCSP 或 PvCSP-VK210 的轉(zhuǎn)基因伯氏瘧原蟲（P. berghei）的保護率均達到70%（圖 4a,c），遠高于混合疫苗組（40%-50%）。在 28 天后的再次挑戰(zhàn)中，雙價疫苗組仍有 66.7%（針對間日瘧原蟲）和 42.9%（針對惡性瘧原蟲）的保護率（圖 4b,d），證明其持續(xù)保護能力。

圖 4 對孢子體挑戰(zhàn)的保護效力。（a）首次挑戰(zhàn) PfCSP/Pb 的結(jié)果；（b）首次存活小鼠再次挑戰(zhàn) PvCSP-VK210/Pb 的結(jié)果；（c）首次挑戰(zhàn) PvCSP-VK210/Pb 的結(jié)果；（d）首次存活小鼠再次挑戰(zhàn) PfCSP/Pb 的結(jié)果。

四、阻斷瘧疾傳播的關(guān)鍵能力4.1 對惡性瘧原蟲的傳播阻斷效果

通過直接飼喂實驗（DFA）評估發(fā)現(xiàn)，接種雙價疫苗的小鼠血液使蚊蟲中腸的卵囊數(shù)量減少 85%（傳播減少活性 TRA=85%），感染蚊蟲的比例從 91.8% 降至 62.2%（傳播阻斷活性 TBA=32%）（圖 5），證明其能有效阻斷惡性瘧原蟲在蚊蟲中的發(fā)育。

圖 5 雙價疫苗對惡性瘧原蟲的傳播阻斷效果（DFA 實驗）。展示了免疫小鼠與對照小鼠血液飼喂蚊蟲后的卵囊數(shù)量差異。

4.2 對間日瘧原蟲臨床分離株的傳播阻斷效果

使用巴西亞馬遜地區(qū)患者的間日瘧原蟲分離株進行膜飼喂實驗（DMFA），結(jié)果更為顯著：

• 短期（免疫后 28 天）：1:5 血清稀釋時，TRA 達 99.08%，TBA 達 87.52%，且對遺傳多樣性的分離株均有效（圖 6、表 2）；

• 長期（免疫后 232 天）：1:5 血清稀釋時，TRA 仍達 89%，TBA 達 67.34%（圖 7），證明疫苗的持久傳播阻斷能力。

圖 6 雙價疫苗對間日瘧原蟲的短期傳播阻斷效果（DMFA 實驗）。展示了不同血清稀釋度下的卵囊數(shù)量差異。

表 2 DMFA 實驗中的 TRA（傳播減少活性）和 TBA（傳播阻斷活性）數(shù)據(jù)。展示了短期和長期免疫血清在不同稀釋度下的效果。

圖 7 雙價疫苗對間日瘧原蟲的長期傳播阻斷效果（DMFA 實驗）。免疫后 232 天的血清仍能顯著減少卵囊數(shù)量。

五、雙價疫苗的優(yōu)勢與應(yīng)用前景5.1 與現(xiàn)有疫苗的比較優(yōu)勢

• 雙重保護：同時針對惡性瘧原蟲和間日瘧原蟲，解決混合感染問題；

• 多階段作用：既阻斷感染（CSP 抗原），又阻斷傳播（s25 抗原），形成防控閉環(huán)；

• 持久效力：免疫應(yīng)答持續(xù) 7 個月以上，滿足季節(jié)性傳播地區(qū)的防控需求；

• 成本效益：雙價疫苗比混合使用兩種單價疫苗更經(jīng)濟，且生產(chǎn)流程更簡單。

盡管成果顯著，仍需解決以下問題：

• VK247 菌株的覆蓋：目前未檢測到針對 PvCSP-VK247 的抗體，需優(yōu)化抗原設(shè)計；

• 免疫干擾：需進一步研究雙價疫苗中抗原間是否存在免疫競爭，可通過調(diào)整劑量或添加佐劑緩解；

• 臨床轉(zhuǎn)化：已在非人靈長類動物中啟動安全性和效力評估，下一步將推進 I 期臨床試驗。

世界衛(wèi)生組織指出，瘧疾消除需要 “全方位策略”，包括 vector control、診斷、治療和疫苗。這種雙價疫苗通過同時降低感染率和傳播率，能與其他措施形成協(xié)同效應(yīng)，尤其在東南亞、南美洲等兩種瘧原蟲共存的地區(qū)，可能加速瘧疾消除進程。

結(jié)語

這款雙價病毒載體疫苗的研發(fā)是瘧疾防控領(lǐng)域的重大突破，其 70% 的保護率和 90% 的傳播阻斷率，以及長達 8 個月的免疫持久性，使其成為應(yīng)對惡性瘧原蟲和間日瘧原蟲共同威脅的理想候選疫苗。隨著臨床研究的推進，有望為全球瘧疾消除事業(yè)提供關(guān)鍵工具，最終減輕數(shù)十億人的疾病負擔(dān)。

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撰寫| 生物制品圈

校稿| Gddra編審| Hide / Blue sea

編輯 設(shè)計| Alice