導(dǎo)讀：呼吸道合胞病毒（RSV）是全球嬰幼兒、老年人及免疫功能低下人群健康的重要威脅。盡管已有3款疫苗獲批，但針對關(guān)鍵人群的保護(hù)仍存挑戰(zhàn)。

新型RSV疫苗的開發(fā)仍是當(dāng)前熱門研究方向之一。

2025年，廣州國家實(shí)驗(yàn)室王忠芳團(tuán)隊(duì)在

Vaccines

Progress on Respiratory Syncytial Virus Vaccine Development and Evaluation Methods

01

RSV疫苗開發(fā)進(jìn)展

RSV 是導(dǎo)致嬰幼兒、老年人和免疫功能低下者呼吸道感染的主要病原體之一，常引發(fā)肺炎或支氣管炎，給全球醫(yī)療系統(tǒng)帶來沉重負(fù)擔(dān)。早在20 世紀(jì) 60 年代，科研人員就開始嘗試研發(fā) RSV 疫苗。首款進(jìn)入臨床試驗(yàn)的滅活 RSV（FI - RSV）疫苗，最終卻以失敗告終，接兒童在感染自然 RSV 后出現(xiàn)了增強(qiáng)型呼吸道疾?。‥RD）。這一結(jié)果歸因于 FI - RSV 疫苗中的 F 蛋白主要以融合后（post - F）形式存在，無法誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體和 CD8? T 細(xì)胞，反而引發(fā)細(xì)胞因子反應(yīng)，導(dǎo)致感染病毒后的癥狀加重。

經(jīng)過多年的努力，不同技術(shù)路線下的RSV 疫苗取得了不同程度的進(jìn)展，其中重組亞單位疫苗和mRNA疫苗脫穎而出，幾款產(chǎn)品成功通過安全性和有效性考核后獲批上市。幾種代表性管線的優(yōu)劣勢如下表所示：

技術(shù)路線

代表疫苗

優(yōu)勢

劣勢

研發(fā)進(jìn)展

重組亞單位

GSK RSVPreF3

安全性高，易于生產(chǎn)

需佐劑增強(qiáng)免疫原性

已獲批

mRNA疫苗

Moderna mRNA-1345

快速開發(fā)，高效免疫應(yīng)答

需脂質(zhì)遞送系統(tǒng)

已獲批

減毒活疫苗

RSV/ΔNS2/Δ1313

模擬自然感染，長效保護(hù)

潛在毒力回復(fù)風(fēng)險(xiǎn)

臨床II期（嬰幼兒）

納米顆粒

Novavax ResVax

增強(qiáng)抗原呈遞，靶向肺部

生產(chǎn)成本高，工藝復(fù)雜

臨床III期失敗

02

RSV抗原選擇

鑒于最初滅活疫苗研發(fā)的失敗，基于重組技術(shù)開發(fā)RSV疫苗成為一種有前景的方向。而在重組類疫苗的開發(fā)路徑中，抗原的選擇至關(guān)重要。

F蛋白（融合蛋白）是RSV病毒表面的關(guān)鍵蛋白，介導(dǎo)病毒與宿主細(xì)胞膜的融合，是疫苗研發(fā)的“核心靶點(diǎn)”。F蛋白包括預(yù)融合構(gòu)象（pre-F）和后融合構(gòu)象（post-F），其中pre-F含6個(gè)中和表位（如Site V、?），而post-F僅保留4個(gè)表位，免疫原性大幅降低。因此，pre-F抗原在RSV疫苗設(shè)計(jì)中更為常見。

其他RSV靶點(diǎn)包括G蛋白（附著蛋白）、核衣殼蛋白N、小疏水蛋白SH等，在病毒附著、或輔助誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫或抗體依賴細(xì)胞毒性（ADCC）方面發(fā)揮作用。

已獲批的GSK重組蛋白疫苗（Arexvy）、輝瑞重組蛋白疫苗（Abrysvo）和Moderna mRNA疫苗（mRNA-1345）均基于pre-F抗原，通過結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)（如DS-Cav1突變）穩(wěn)定其構(gòu)象，成功誘導(dǎo)高效中和抗體。

03

RSV疫苗的免疫評估方法

在疫苗研發(fā)過程中，對安全和有效性的評估至關(guān)重要。除了傳統(tǒng)的基于實(shí)際保護(hù)效果的評估方法外，免疫替代指標(biāo)的研究也為疫苗評價(jià)提供了新的思路。免疫替代終點(diǎn)是指與疫苗保護(hù)效果相關(guān)的免疫指標(biāo)，通過檢測這些指標(biāo)，可以在更短的時(shí)間內(nèi)、以更低的成本評估疫苗的有效性。例如，對于流感疫苗，血凝抑制滴度（HI）≥40 被推薦作為評估新候選疫苗 50% 保護(hù)效力的免疫替代指標(biāo)。對于 RSV 疫苗，基于其免疫原性和有效性之間的顯著正相關(guān)性，中和抗體和細(xì)胞免疫可以作為評估疫苗的替代終點(diǎn)。

在疫苗有效性評估中，常用的免疫標(biāo)記物包括：中和抗體、T細(xì)胞應(yīng)答和B細(xì)胞記憶。

中和抗體評估：中和抗體滴度是評估體液免疫的常用指標(biāo)，與RSV 疫苗的保護(hù)效果和持久性密切相關(guān)。多項(xiàng)研究表明，RSV 中和抗體在預(yù)防 RSV 相關(guān)疾病中發(fā)揮著重要作用。常用的中和試驗(yàn)包括基于細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）的微中和試驗(yàn)（MCPENT）和基于噬斑減少的噬斑減少中和試驗(yàn)（PRNT），在臨床前和臨床試驗(yàn)中廣泛使用。為了加快疫苗研發(fā)，一些高通量方法也應(yīng)運(yùn)而生，如使用表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP）或熒光素酶蛋白的 RSV 病毒，能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化圖像采集和焦點(diǎn)計(jì)數(shù)，每天可篩選數(shù)百個(gè)樣本。此外，世界衛(wèi)生組織（WHO）的 RSV 國際標(biāo)準(zhǔn)抗血清（RSV IS）為不同實(shí)驗(yàn)室和檢測方法提供了統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，有助于準(zhǔn)確評估中和抗體反應(yīng)。

T 細(xì)胞反應(yīng)評估：T 細(xì)胞反應(yīng)在 RSV 感染的免疫過程中也起著關(guān)鍵作用，CD8+ T細(xì)胞清除感染細(xì)胞，CD4+ T細(xì)胞輔助抗體產(chǎn)生。T 細(xì)胞反應(yīng)的檢測方法包括酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISpot）、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色（ICS）和通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行的表面激活標(biāo)記（AIM）分析等 。在 RSV 疫苗的評估中，常通過檢測 IFN - γ、TNF - α、IL - 2 和 IL - 4 等細(xì)胞因子的分泌來確定 RSV 特異性 T 細(xì)胞反應(yīng)。

B 細(xì)胞記憶評估：記憶B 細(xì)胞在維持體內(nèi)抗體水平方面發(fā)揮著重要作用，是疫苗效力的一個(gè)潛在指標(biāo)。評估記憶 B 細(xì)胞反應(yīng)的方法主要基于單細(xì)胞 BCR 技術(shù)，包括 LIBRA - seq 技術(shù)或巢式 BCR PCR 結(jié)合單細(xì)胞分選，以獲取免疫原特異性 B 細(xì)胞的可變、多樣性和連接序列，從而確定 BCR 庫、免疫球蛋白重鏈可變區(qū)使用情況和 CDR3 序列。通過與已知的 BCR 使用情況或現(xiàn)有高親和力抗體序列進(jìn)行比較，可以量化體液免疫反應(yīng)，并比較不同疫苗或免疫劑量產(chǎn)生的抗體成分差異。

04

小結(jié)

這篇綜述全面解析了RSV疫苗的開發(fā)現(xiàn)狀，同時(shí)為RSV疫苗的抗原選擇和免疫評估等實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提供了方案指導(dǎo)，為傳染病疫苗的開發(fā)提供重要參考。

RSV疫苗的研發(fā)經(jīng)歷了滅活疫苗的慘痛失敗，逐步發(fā)展到基于pre-F抗原的重組蛋白與mRNA疫苗獲批上市，這一成功受益于蛋白質(zhì)工程和結(jié)構(gòu)生物學(xué)等突破性技術(shù)的發(fā)展。隨著新型疫苗技術(shù)（如mRNA）的逐漸成熟與疫苗免疫評估體系的不斷完善，未來RSV疫苗有望覆蓋嬰幼兒、孕婦等關(guān)鍵人群。

參考文獻(xiàn)

[1] Deng, L.; Cao, H.; Li, G.; Zhou, K.; Fu, Z.; Zhong, J.; Wang, Z.; Yang, X. Progress on Respiratory Syncytial Virus Vaccine Development and Evaluation Methods. Vaccines 2025, 13, 304. https://doi.org/10.3390/vaccines13030304.

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撰寫| 工程菌星球

校稿| Gddra編審| Hide / Blue sea

編輯 設(shè)計(jì)| Alice